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    月示蛋白胨具體該如何使用呢?

    發(fā)布時(shí)間: 2025-11-23  點(diǎn)擊次數(shù): 167次
      月示蛋白胨是一種重要的微生物培養(yǎng)基原料,在微生物學(xué)研究和生物發(fā)酵領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。其是混合酶消化組織蛋白,是用精蛋白為基質(zhì),經(jīng)特殊水解提取制備的干燥粉末,營(yíng)養(yǎng)豐富,富含大量高分子質(zhì)量多肽、游離氨基酸和生長(zhǎng)促進(jìn)因子,可做多種培養(yǎng)基的基礎(chǔ)材料。適宜于細(xì)菌產(chǎn)毒素培養(yǎng)和營(yíng)養(yǎng)要求苛刻的微生物培養(yǎng)。蛋白胨是將肉、酪素或明膠用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外觀呈淡黃色的粉劑,具有肉香的特殊氣息。蛋白質(zhì)經(jīng)酸、堿或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。
      月示蛋白胨其使用方法需結(jié)合培養(yǎng)基的配制流程進(jìn)行,以下是詳細(xì)步驟:
      1、計(jì)算與稱量
      根據(jù)目標(biāo)微生物的營(yíng)養(yǎng)需求,按配方比例計(jì)算月示蛋白胨的用量(如每升培養(yǎng)基添加10-20g)。
      使用潔凈的稱量工具(如電子天平、牛角匙)快速稱取蛋白胨,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露吸濕。若需與其他成分(如牛肉膏、NaCl)混合,需按順序依次稱取,并防止交叉污染。
      2、溶解與混合
      將稱取的蛋白胨加入適量蒸餾水或去離子水中,用玻璃棒攪拌至初步溶解。
      若配方含其他成分(如葡萄糖、瓊脂),需分步溶解:先溶解蛋白胨等易溶物質(zhì),再加入難溶成分(如瓊脂需加熱溶解),最后補(bǔ)足水量至所需體積。
      3、調(diào)節(jié)pH值
      用精密pH試紙或酸度計(jì)測(cè)量溶液原始pH值。
      若pH偏低,逐滴加入1mol/L NaOH溶液;若偏高,則加入1mol/L HCl溶液,邊加邊攪拌并實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)pH,直至達(dá)到目標(biāo)值(如7.2-7.6)。
      注意:避免pH調(diào)節(jié)過(guò)頭,否則需回調(diào),可能影響培養(yǎng)基離子濃度。
      4、過(guò)濾(可選)
      若培養(yǎng)基需高度透明(如用于觀察菌落形態(tài)),可趁熱用濾紙或多層紗布過(guò)濾,去除雜質(zhì)。
      普通實(shí)驗(yàn)可省略此步驟。
      5、分裝與包扎
      液體培養(yǎng)基:分裝至試管或三角瓶,裝量不超過(guò)容器容積的1/2(試管裝至1/4高度,便于搖勻)。
      固體培養(yǎng)基:分裝后加入瓊脂(1.5%-2%),加熱溶化后分裝,滅菌后冷卻凝固成斜面或平板。
      包扎:試管口塞棉塞(或泡沫塑料塞),外包牛皮紙并用麻繩扎緊;三角瓶同樣包扎,標(biāo)注培養(yǎng)基名稱、配制日期。
      6、滅菌
      采用高壓蒸汽滅菌法:121℃(0.103MPa)滅菌15-20分鐘。
      特殊情況:若培養(yǎng)基含葡萄糖等易分解成分,可分開滅菌(蛋白胨溶液與葡萄糖溶液分別滅菌后混合),或在中性pH條件下滅菌再調(diào)pH。
      7、使用與儲(chǔ)存
      使用前:檢查培養(yǎng)基是否渾濁、有無(wú)污染(如長(zhǎng)菌斑)。
      使用中:無(wú)菌操作下傾注平板或接種微生物,按目標(biāo)條件培養(yǎng)(如35℃、18-24小時(shí))。
      儲(chǔ)存:未滅菌的培養(yǎng)基需冷藏(2-8℃);滅菌后培養(yǎng)基若未及時(shí)使用,應(yīng)冷藏保存并在1周內(nèi)用完。
     

    月示蛋白胨

     

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